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El
sistema de ELISA es indudable-mente el que más se utiliza
en la práctica diaria.
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Los
métodos para diagnosticar la in- fección de los virus
de la inmunodeficiencia humana se basan principalmente en los siguientes
principios: la detección de anticuerpos contra el virus como
el ELISA y Western blot, la detección del material genético
del virus mediante la reacción en cadena de la polimerasa
(RCP), el cultivo del virus y la detección del antígeno
p 24 mediante un sistema inmunoenzimático.
El sistema de ELISA es indudablemente el que más
se utiliza en la práctica diaria; éste se basa en
una serie de reacciones antígenoanticuerpo y en una
reacción enzimasubstrato. Este estudio permite saber
finalmente si el suero del paciente que estamos estudiando tiene
o no anticuerpos contra algunas de las estructuras del virus que
son utilizadas como antígenos en el primer paso de esta técnica.
Existen en el mercado nacional varios sistemas comerciales que se
realizan en placas, tubos, fase sólida en forma de peine,
etc., pero conceptualmente basadas en los mismos principios. La
sensibilidad de las pruebas es superior a 97% en la mayoría
de estos productos, la especificidad oscila entre 96 y 98%. Sin
embargo el valor predictivo positivo de la prueba se va a ver influenciado
por la prevalencia de la infección en la población
a la que pertenezca el paciente como se explicará mas adelante.
El Western blot es una técnica más
elaborada que requiere equipo complejo y personal de laboratorio
con adiestramiento especializado. Éste se basa esencialmente
en separar las principales estructuras del virus en un gel de poliacrilamida,
mediante la aplicación de corriente eléctrica la cual
hace correr estas proteínas y glicoproteínas de acuerdo
a su peso molecular. Una vez separadas, son transferidas a un papel
de nitrocelulosa donde se agrega el suero en estudio y si éste
tiene anticuerpos contra las estructuras virales nos daremos cuenta
por la presencia de bandas.
Los resultados que nos informa el laboratorio
son tres: un resultado positivo es cuando aparecen múltiples
bandas, un resultado negativo es cuando no aparece ninguna banda
y un resultado indeterminado es cuando sólo aparece alguna
o algunas bandas pero que no son suficientes
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para
ser considerado como positivo. Esto puede ser debido a que se trata
de: 1) infección en etapa temprana, 2) infección con
el VIH2, ya que comparten algunas proteínas y otras
son totalmente distintas ó 3) se trate de una reacción
inespecífica.
Las opciones que tenemos para resolver estos informes
de indeterminados son las siguientes: podemos repetir el Western
blot cada dos meses hasta los seis meses y si éste continúa
indeterminado es considerado como negativo, ya que si se tratara
de una infección temprana, este período bastaría
para hacerse positivo, es decir, aparecerían el resto de
las bandas necesarias para el diagnóstico. En los casos donde
la sospecha clínica es importante, porque el paciente presente
signos de inmunodeficiencia y/o infecciones oportunistas, se puede
solicitar un ELISA o un Western blot específicos para el
VIH2. En la actualidad también tenemos la opción
de realizar la reacción en cadena de la polimerasa para resolver
los informes indeterminados en una forma más temprana.
Volviendo al valor predictivo positivo (VPP) de
las pruebas y entendiendo por qué debemos confirmar todos
los resultados de ELISA positivos mediante el Western Blot (WB)
utilizaremos los siguientes ejemplos:
- Consideremos
una población de homosexuales promiscuos que no usa preservativos
donde la seroprevalencia puede ser de hasta 20%; bajo estas
circunstancias el VPP del ELISA es de 98%, si adicionalmente
realizamos el WB el VPP se eleva a 99.9%.
- Por otro
lado consideramos una comunidad de religiosas sin actividad
sexual, ni otras conductas que las pusieran en riesgo de adquirir
esta infección en donde la seroprevalencia esperada es
menor a 1%; bajo estas otras circunstancias el VPP del ELISA
es sólo 28.4%. Lo que significa que sólo un tercio
de los resultados positivos en esta población realmente
estarían reflejando infección y más de
dos tercios de las veces serían falsos positivos. Si
adicionalmente realizáramos el WB el VPP también
se eleva a 99.9%.
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